想了解堿性磷酸酶看這篇文章就行了
更新時間:2022-04-14 點擊次數(shù):1323
堿性磷酸酶是廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶,是免疫診斷試劑中常用的生物標志物,也是重要的治療靶點。檢測堿性磷酸酶可用于肝臟功能異常,骨質疏松和糖尿病等疾病的診斷。常見的堿性磷酸酶底物有PNPP、BCIP/NBT組合。
PNPP:中文名稱為對硝基苯磷酸二鈉,廣泛用作ELisa檢測堿性磷酸酶的底物。原理是,堿性溶液中無色的對硝基苯磷酸二鈉(PNPP)可被堿性磷酸酶催化分解出磷酸酰基,磷酸酰基與受體物結合,生成游離的對硝基苯酚,對硝基苯酚在堿性溶液中轉變?yōu)轷浇Y構,呈現(xiàn)較深的黃色,即水溶性黃色產(chǎn)物。在波長405nm處檢測吸光度增高速率,則可檢測堿性磷酸酶。
對硝基苯磷酸二鈉(PNPP)還用于農(nóng)藥殘留檢測、古文物膠原蛋白檢測等,也是醫(yī)藥、農(nóng)藥合成領域的重要化工中間體。
BCIP/NBT:是堿性磷酸酶的發(fā)光底物組合,其原理是在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會被水解產(chǎn)生強反應性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會和NBT發(fā)生反應,形成不溶性的深藍色至藍紫色的產(chǎn)物,具有強特征性,易于捕捉分析,從而達到標記作用。
BCIP又稱對甲苯氨藍,除作為堿性磷酸酶化學組織底物應用于生化研究、醫(yī)藥領域外,還用于食品安全檢測中。
NBT,即氯化硝基四氮唑藍,在免疫印跡實驗中檢測堿性磷酸酶底物是其最常見的應用。此外,氯化硝基四氮唑蘭(NBT)還作為脫氫酶和其它過氧化酶的底物,用于測定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、乳酸脫氫酶、超氧化物歧化酶等。