在配制培養(yǎng)基時,
干粉培養(yǎng)基應(yīng)選擇合適的脫水培養(yǎng)基或單獨的配方。脫水介質(zhì)應(yīng)附有使用處方和使用說明,并應(yīng)按照使用說明配制,以確保介質(zhì)質(zhì)量符合要求。脫水介質(zhì)應(yīng)使用無結(jié)塊或顏色變化。干粉介質(zhì)或單個配方成分應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)臈l件下,如低溫、干燥和黑暗,所有容器應(yīng)密封,特別是含有脫水介質(zhì)的容器。除處方和使用說明外,商業(yè)成品培養(yǎng)基還應(yīng)注明有效期、貯存條件、質(zhì)量控制菌和使用適宜性檢驗試驗。
干粉培養(yǎng)基是微生物檢測的基礎(chǔ),直接影響微生物檢測的結(jié)果。適宜的制備方法、貯存條件和質(zhì)量控制試驗是提供培養(yǎng)基的保證。
微生物實驗室使用的干粉培養(yǎng)基可以按照處方配制,也可以按照處方配制處方脫水培養(yǎng)基。在制備過程中,應(yīng)選擇合適的脫水介質(zhì)或單獨的配方。(附處方及說明書,按說明書進行配制,確保質(zhì)量符合要求。不得使用集總脫水或變色脫水介質(zhì)。)
干粉介質(zhì)或單個配方成分應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)臈l件下,如低溫、干燥和黑暗,使用的容器應(yīng)密封,特別是在容器中。除處方和使用說明外,商業(yè)成品培養(yǎng)基還應(yīng)注明有效期、貯存條件、質(zhì)量控制菌和使用適宜性試驗。為了保證質(zhì)量的穩(wěn)定性和可靠性,每一種脫水介質(zhì)或每一種配方成分都應(yīng)準(zhǔn)確稱量,并要求具有一定的準(zhǔn)確度。
為了保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,每一種脫水培養(yǎng)基或每一配方成分都要準(zhǔn)確稱量,并要求一定的準(zhǔn)確度。介質(zhì)制備中常用的溶劑是純凈水。在特殊情況下,可能需要去離子水和蒸餾水。每個重量的重量和用水量都應(yīng)該記錄下來。培養(yǎng)基制備過程中使用的容器及附件應(yīng)保持清潔,玻璃器皿應(yīng)用純凈水沖洗,去除洗滌劑殘留及異物。對于熱敏性培養(yǎng)基,如糖發(fā)酵培養(yǎng)基,其容器應(yīng)提前消毒,以保證培養(yǎng)基的無菌性。
脫水后的培養(yǎng)基應(yīng)*溶解在水中,再進行分離消毒。如果需要加熱制劑以助溶解,應(yīng)注意不要過熱,避免介質(zhì)變色。如果需要添加其他組,請將它們*混合。培養(yǎng)基應(yīng)按廠家提供的參數(shù)消毒或經(jīng)用戶驗證。商業(yè)成品媒體必須附有滅菌方法的信息。培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾滅菌。
干粉培養(yǎng)基的滅菌不當(dāng)可能導(dǎo)致顏色變化,透明度,減少或更改在瓊脂凝固或博士因此,培養(yǎng)基應(yīng)由驗證殺菌消毒過程,以及培養(yǎng)基的滅菌方法和條件應(yīng)由無菌驗證試驗和促生長試驗。此外,還應(yīng)對高壓蒸汽分離器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)進行驗證,以確保在一定的加載模式下熱分布正常。緩慢上升的高壓釜可能會導(dǎo)致干粉培養(yǎng)基過熱,過度滅菌可能會破壞大多數(shù)生長用的細菌和真菌培養(yǎng)基的質(zhì)量。滅菌器中介質(zhì)的體積和負荷也會影響加熱速度。因此,應(yīng)根據(jù)殺菌介質(zhì)的特點,確定一套綜合的殺菌程序。
自配介質(zhì)應(yīng)標(biāo)明名稱、批號、制備日期,并在已證明的條件下保存。商業(yè)成品的標(biāo)簽應(yīng)當(dāng)標(biāo)明該商品的品名、批號、生產(chǎn)日期、有效期和有關(guān)特性。制造商和用戶應(yīng)按照操作說明的要求保存介質(zhì)。使用的儲運條件應(yīng)使成品介質(zhì)失水,并提供機械保護。
如果培養(yǎng)基在滅菌后儲存在高壓釜中,可能會影響其質(zhì)量。一般不建議使用這種存儲方法。瓊脂培養(yǎng)基不應(yīng)儲存在0℃或以下,因為冷凍可能會破壞凝膠的性能。
文化媒體應(yīng)遠離陽光。長期儲存時,應(yīng)置于密閉容器內(nèi),以防失水。瓊脂板可以使用了。如存放在冰箱內(nèi),應(yīng)密封不超過一周。如果儲存時間較長,應(yīng)通過驗證來確定保質(zhì)期。
滅菌后的固體培養(yǎng)基只允許再解凍一次,以免培養(yǎng)基質(zhì)量惡化或因加熱過度而造成微生物污染。介質(zhì)的重熔通常通過水浴加熱或循環(huán)蒸汽進行。假如使用微波爐,應(yīng)避免介質(zhì)過熱和水分蒸發(fā),更要注重安全。溶化后的培養(yǎng)基應(yīng)置于45 ~ 50℃的水浴中浸泡不超過8小時。在傾倒培養(yǎng)基時,應(yīng)將培養(yǎng)基容器表面的水擦干,以免培養(yǎng)基外壁的水滴進入培養(yǎng)基造成污染。
使用過的干粉介質(zhì)(包括無效介質(zhì)),按照國家有關(guān)污染廢物處理的規(guī)定處理。
干粉培養(yǎng)基質(zhì)量控制試驗
實驗室應(yīng)建立質(zhì)量控制程序(即,用于測試媒體,以確保所使用媒體的質(zhì)量符合相關(guān)測試要求。
實驗室制備或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量取決于其制備過程,使用不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基會影響微生物的生長或復(fù)蘇,從而影響檢測結(jié)果的可靠性。
制備的培養(yǎng)基應(yīng)定期檢測,以進行質(zhì)量控制。實驗室制備的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)測包括pH值、適宜性試驗和定期穩(wěn)定性試驗,以確定有效期。介質(zhì)質(zhì)量應(yīng)在有效期內(nèi)根據(jù)適宜性試驗確定。有效期的長短將取決于在一定的儲存條件下介質(zhì)組成的穩(wěn)定性,包括容器的特性和密封性。
在實驗室中,如果采用身份驗證培養(yǎng)基的制備和制備和滅菌程序控制過程,所以同樣的脫水培養(yǎng)基的適用性可以檢查只測試一次,測試菌株可以根據(jù)的目的進行選擇培養(yǎng)基從相關(guān)的附件,也可以增加生產(chǎn)環(huán)境的污染和產(chǎn)品常見的菌株。如果干粉介質(zhì)的質(zhì)量控制試驗不符合要求,應(yīng)找出不合格的原因,防止問題再次發(fā)生。不符合要求的介質(zhì)不得使用。
環(huán)境監(jiān)測使用的介質(zhì)應(yīng)當(dāng)特別保護。用于關(guān)鍵區(qū)域監(jiān)測的介質(zhì)應(yīng)雙重包裝并消毒。如不能使用絕育培養(yǎng)基,應(yīng)在使用前進行100%預(yù)培養(yǎng),防止外來污染物進入環(huán)境,避免假陽性結(jié)果。