目前用于紡織退漿的淀粉酶主要有枯草桿菌淀粉酶(α-淀粉酶),淀粉糖化酶(β-淀粉酶),胰淀粉酶,麥芽淀粉酶等。我國主要采用耐熱性強的枯草桿菌淀粉酶即α-淀粉酶(枯草桿菌),β淀粉酶屬于一種細菌淀粉酶是由地衣芽孢桿菌經(jīng)液體深層發(fā)酵,提取等工序精制而成的淺褐色液體生物制劑,L-02人正常肝細胞廣泛應(yīng)用于啤酒等生產(chǎn)中。它對溫度有較強的適應(yīng)能力。它并非為單一為單一淀粉酶,還含有其它酶組分。后者含量較少,但它們的存在有利于去除織物上的油脂,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),L-02人正常肝細胞嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng),具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
L-02人正常肝細胞經(jīng)過嚴格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),人正常肝細胞;L-02純度可達98%。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。L-02人正常肝細胞采用干冰運輸,客戶收到細胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。公司實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴格檢驗,分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
L-02人正常肝細胞運輸與保存:本品使用10%DMSO凍存液冷凍,采用干冰保存運輸,收到細胞后,如果不立即復(fù)蘇,請將細胞放入液L-02人正常肝細胞;L-02復(fù)蘇方法:取出凍存管后,投入37 ℃水浴中,震蕩解凍2 min,酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺中,將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入5 ml 37 ℃預(yù)熱的培養(yǎng)基,并清洗凍存管一次,將離心管離心(1000 rpm,5 min),棄去上清液,再加入2 ml培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。